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至超级显微技术:看清T细胞受体空间分布

发布时间:2021-10-11

超级显微技术:看清T细胞受体空间分布

对CD4 T细胞而言,TCR与辅助受体CD4是其10分重要的受体份子。在激活进程中,TCR和CD4分别与MHC-抗原复合体结合实现信号的传递。以上的事实已被很多研究所证实,而这些份子究竟在细胞膜上怎样排列却1直1来没有构成1致的结论。近,来自斯坦福大学免疫学系的MarkM.Davis研究组在《PNAS》杂志发表了他们利用超分辨显微技术探究了CD4 细胞表面的TCR,CD4和其他份子在激活前后的空间散布情况。 首先,作者利用PLAM视察了激脆性材料的拉伸及紧缩性能及破坏情势差异很大活前T细胞表面的CD4的散布情况。结果显示:即便在未激活状态,CD4在细胞膜潜力很大上也不是随机散布的。它们会自发聚集构成纳米级别的团状物,这些团状物在细胞接受激活后会明显增大。

以后,作者分别利用红色荧光蛋白与绿色荧光蛋白标记了CD3 链和CD4,比较了刺激前后CD4与TCR的散布特点。结果显示,在激活之前,13⑴8个CD3 链构成 岛 状结构,而4⑻个CD4份子构成 岛 状结构。而CD4与CD3 链的相互接触仅产生在各自 岛 状结构的边沿区域。在激活状态下,两类 岛 状结可以公道地肯定各种材料塑件的公道公差和相应的模具制造公差构相互隔离程度产生了增强。以上结果说明不论处于激活状态与否,TCR与CD4的接触仅产生在它们各自的团状结构的边沿地带。

另外,作者利用了另外1套超分辨的显微技术 dSTORM 重复了上述实验。结果与双色PALM的结果1致。以后,作者利用这1技以技术创新为驱动术比较了刺激前后TCR的散布情况。结果显示,在刺激状态下,TCR会相互聚集构成大型的团状结构,而CD4份子则会被 排挤 在SMAC结构以外。

LCK是src家族的1类激酶,它作用于TCR信号的下游,是T细胞激活的胞内关键信号转导份子。为了视察刺激前后lck在膜附近的散布情况,作者通过导入1个稳定激活的lck蛋白,通过dSTORM技术视察了lck份子分别与CD3 链和CD4的共定位情况。结果显示:在激活之前,lck与两类受体均具有较高的共定位情况,而在激活以后,lck与CD3 链和CD4团状结构均出现了明显的分界限。

综上,这篇研究为了们提供了1个10分清晰的T细胞受体团体的散布情况,对我们了解T细胞受体复合物的构成具有很大的帮助。